DNA测序| 脱氧核糖核酸– DNA

DNA测序

在DNA测序中,生化方法用于确定DNA分子中核苷酸的序列(带有糖和磷酸盐的DNA基础分子)。 最广泛使用的方法是Sanger链终止方法。 由于DNA由四个不同的碱基组成,因此有四种不同的方法。

每种方法都包含要测序的DNA,引物(用于测序的起始分子),DNA聚合酶(用于扩展DNA的酶)以及所有四个所需核苷酸的混合物。 但是,在这四种方法中的每一种中,化学修饰不同的碱基的方式都可以并入,但不能为DNA聚合酶提供作用点。 然后这导致链终止。 该方法产生不同长度的DNA片段,然后根据其长度通过所谓的凝胶电泳化学分离。 通过使用不同的荧光色标记每个碱基,可以将所得的分选结果翻译为测序的DNA部分中的核苷酸序列。

DNA杂交

DNA杂交是一种分子遗传学方法,用于证明不同来源的两条单链DNA之间的相似性。 该方法利用了DNA双链始终由两条互补的单链组成的事实。 两条单链彼此越相似,则更多的碱基与相反的碱基形成牢固的连接(氢键)或形成更多的碱基对。

具有不同碱基序列的两条DNA链上的片段之间不会发生碱基配对。 现在可以通过确定新形成的DNA双链分离的熔点来确定化合物的相对数目。 熔点越高,互补的碱基彼此形成的氢键越多,两条单链越相似。 该方法还可以用于检测DNA混合物中的特定碱基序列。为此,可以使用(荧光)染料标记人工形成的DNA片段。 然后,这些标记用于标记相应的碱基序列,从而使其可见。