聚合酶链反应:治疗,影响和风险

聚合酶链式反应代表了分子生物学中的一种程序,该程序复制了遗传物质中的片段(脱氧核糖核酸,DNA)。 微量的DNA可以产生数百万份相同的拷贝。 这样,可获得足以进行各种研究的数量。

什么是聚合酶链反应?

聚合酶链反应代表了一种分子生物学方法,该方法可以复制遗传物质中的片段(脱氧核糖核酸,DNA)。 聚合酶链式反应(PCR)一词描述了借助酶聚合酶(DNA聚合酶)进行的体外(拉丁语:在玻璃杯中)反应,该反应可导致某些 基因 序列。 反应产物也是该反应新循环的起始原料。 的数量 分子 翻倍,同时用作新循环的模板。 这称为指数乘法。 它在实验室中以几分钟的高速度进行,类似于连锁反应。 该实验室过程模仿了在复制过程中自然条件下发生的遗传信息(DNA)的复制。 美国化学家KB Mullis被认为是这一过程的发现者。 1983年,他介绍了这种DNA合成方法,并在十年后获得了诺贝尔化学奖。

功能,效果和目标

在生物体中,DNA 染色体 具有无法使用PCR扩增的长度。 相反,它用于放大定义的部分。 这可以是基因, 基因,或未转录成的区域 蛋白质,即非编码。 这些部分通常包含不超过三千个碱基对,而每套碱基对大约为三十亿个碱基对的两倍 染色体 在人类中。 聚合酶链反应需要单链或双链DNA链,其结构必须至少是部分已知的。 除了酶以外,还使用两种引物。 这些是DNA的组成部分,它们充当起点和终点。 它们的特征是与待扩增区域完全匹配的序列。 在实验室中,聚合酶链式反应是在可编程加热模块中进行的。 必要的组件,例如聚合酶,引物,构建新链的构件(脱氧核糖核苷三磷酸)和 离子一起添加到缓冲溶液中。 反应的温度-时间程序从高于94°C的变性开始。 在该过程中,双链DNA被切割并以单链形式存在。 在下一步中,在大约70°C下,将引物与 基因 测序并形成酶反应的起点。 从这里开始,聚合酶合成互补链。 然后开始一个新的循环,该循环又由变性,引物结合和DNA链合成三个步骤组成。 聚合酶链反应用于法医学,临床诊断和临床研究。 在法医科学中,DNA是从 皮肤, 唾液, 头发,精液或 血液 来自犯罪现场,并经过放大后,与已知样本进行比较,并用于识别特定个人。 使用这种遗传指纹,也可以通过修改后的方法来澄清亲子关系。 在阐明疾病中,聚合酶链反应用于验证所涉及的基因。 一些细菌性疾病可以通过识别特定序列来分类。 当病毒DNA或RNA被转化和扩增时,可以表征病毒性疾病。 在 血液 筛查,有可能发现 肝炎 或艾滋病毒介导的疾病。 在肿瘤诊断中,它用于鉴定肿瘤细胞。 这样就可以对肿瘤进行分类,评估疾病的进程,成功的治疗方法。 治疗 和预后。 在研究中,聚合酶链反应用于鉴定与各种疾病相关的基因。对于基因克隆,与克隆生物体不同的是,该基因在被转移到载体中的其他生物体之前被扩增(拉丁文:旅行者,载体)。 )。 这些可以作为更好地研究疾病或产生疾病的模型 蛋白质 可以用作 毒品.

风险与危害

聚合酶链反应在检测微量DNA方面具有巨大潜力。 为了利用多种可能性并防止重大错误,必须考虑某些前提条件和各种错误源。 只有序列至少部分已知的遗传材料部分才能被扩增。 完全未知的序列不能通过这种方法扩增。 放大后的产物可以被可视化。 如果期望的信号不可见,则尽管存在寻找的序列,但存在假阴性结果。 大多数情况下,这是未优化或优化条件不佳的结果。 这些必须根据靶序列确定。 为此,测试了不同的温度和时间曲线,引物序列和量以及反应混合物中其他物质的浓度。 误报结果显示为无法分配给所需产品的信号。 主要问题是由研究人员或其他来源的DNA污染所致。 细菌来源的DNA也影响聚合酶链反应的结果。 通过戴上手套并格外小心,可以防止此类错误,并可以得出有关扩增产物的可靠结论。